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上海酶联生物科技有限公司
入驻年限：3 年
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联系人：
周舟
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所在地区：
上海 闵行区
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业务范围：
试剂、抗体、细胞库 / 细胞培养、ELISA 试剂盒、技术服务、耗材
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经营模式：
代理商 生产厂商 经销商
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公司新闻/正文
荧光定量PCR试剂盒的操作步骤注意以下几点
人阅读 发布时间：2023-03-03 09:10
荧光定量PCR试剂盒的操作步骤
1、取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其溶解。
2、两相分离每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。
3、RNA沉淀将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
4、RNA清洗移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
5、RNA干燥小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
6、溶解RNA沉淀溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
上海酶联生物科技有限公司的产品在相当宽的领域得到广泛的应用，长期和各大高校、研究机构、工厂、企业等建立了深厚的合作关凢系，我们的企业文化是为树立行业的地位而不懈努力，为科研事业贡献绵薄之力！公司的核心价值是诚信为本，质量第一，为客户提供高品质的产品、为员工提供发展平台、为社会创造更多价值。
以上是荧光定量PCR试剂盒的操作步骤，希望可以帮助到大家。
1、取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其溶解。
2、两相分离每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。
3、RNA沉淀将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
4、RNA清洗移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
5、RNA干燥小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
6、溶解RNA沉淀溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
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